一. 定性分析
選擇合適的溶劑（非極性），使用有足夠純度單色光的分光光度計(jì)，在相同的條件下測定相近濃度的待測試樣和標(biāo)準(zhǔn)品的溶液的吸收光譜，然后比較二者吸收光譜特征：吸收峰數(shù)目及位置、吸收谷及肩峰所在的位置（ l ）等；分子結(jié)構(gòu)相同的化合物應(yīng)有完全相同的吸收光譜。
二. 定量分析
（一）單組分定量分析方法
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法：配制一系列（5~10）個(gè)不同c的標(biāo)準(zhǔn)溶液 ，在適當(dāng)l —— 通常為 lmax下，以適當(dāng)?shù)目瞻兹芤鹤鲄⒈?，分別測定A，然后作 A-c 曲線同條件下測定試樣溶液吸光度 Ax ，查找對(duì)應(yīng)的 cx 。
2. 直接比較法：已知試樣溶液基本組成，配制相同基體、相近濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別測定吸光度A標(biāo)、A樣
根據(jù) L-A 定律： A標(biāo) = K · b · c標(biāo) A樣 = K · b · c樣
則 
(18)
（二）多組分定量分析
混合組分的吸收光譜相互重疊的情況不同，測定方法也不相同，常見混合組分吸收光譜相干擾情況有以下三種：
 |
圖5 混合組分吸收光譜的三種相干情況示意圖
1.第一種情況：各種吸光物質(zhì)吸收曲線不相互重疊或很少重疊，則可分別在l1 及 l2 處測定 a 及 b 組分的 c；
2. 第二種情況 部分重疊：先在 l1 處測得 ca ,再在 l2 處測得混合組分的吸光度 Aa+b ，根據(jù)吸收定律加和性：
即可求得cb。[應(yīng)先求得 ea(l2 ) ，與 ea(l2 ) ，并使用相同 b ]
3. 第三種情況:兩吸收曲線互相重疊，但服從 L-B 定律
(1) 解方程組法：
若試樣中需要測定兩種組分，則選定兩個(gè)波長l1 及 l2 ，測得試液的吸光度為 A1和 A2，則可解方程組求得組分a、b 的濃度ca、cb ：
如果混合物含有 n 個(gè)組分，可不經(jīng)分離，在 n 個(gè)適當(dāng)波長處進(jìn)行 n 次測量，獲得 n個(gè)吸光度值，然后解 n 個(gè)聯(lián)立方程以求得各組分的濃度。
（2）等吸光度雙波長（消去）法
吸收光譜重疊的 d、e 兩組分共存，現(xiàn)設(shè)法把一種組分(a)的吸光度消去。方法如下：
e
圖6 二組分混合物吸收光譜用作圖法選擇l1、l2（雙波長分光光度法）
選取兩個(gè)適當(dāng)?shù)牟ㄩLl1 和 l2 ，
使 e1d= e2d ，而
盡可能大，則用這兩個(gè)波長l1 和 l2測得混合物溶液吸光度之差 ∆A 應(yīng)只與 ce 成正比（而與cd無關(guān)），直接測得ce ：
因?yàn)?/SPAN> 
所以 
若用 1cm 吸收池
若需測定另一組分 d 時(shí)，也可用同樣方法，選擇另一個(gè)l1’ 和 l2’ ，先消去的 e 的干擾，直接求cd
