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BZ010 -水稻Cry1Ac 基因序列定性PCR 檢測試劑盒

   2011-05-31 中國食品網(wǎng)中食網(wǎng)670


BZ010 -水稻Cry1Ac 基因序列定性PCR 檢測試劑盒
包括100 個擴增反應所需的試劑

【試劑盒組成】

2 x 275 μl Cry1Ac 反應試劑 (Cry1Ac mastermix; -20oC 保存)

1 x 50 μl 陽性對照 (Positive control; -20oC 保存)

 

【保存條件】

1.反應試劑和陽性對照應儲存在 -20°C。保質期標注在盒子上。

2.請分裝PCR 反應試劑,以避免重復冷凍和解凍。頻繁的解凍和冷凍可能導致成分失去活性。

3.使用前在冰上溶解各試劑并充分混合,不要旋渦振蕩含酶的擴增反應試劑。

 

【操作過程】

1.在冰上解凍PCR 反應試劑。

2.準備反應試劑:

3.加入適當份量的DNA 模版和雙蒸水。

每次PCR 檢測都應該設置陽性對照(2 μl)和陰性對照(2 μl 水)

每個檢測樣品應該設置兩個PCR 重復反應

為了驗證陰性實驗結果不是由于樣本中存有PCR 抑制物而導致PCR 呈陰性反應,建議在測試樣本中加1 μl 的陽性對照作為spiking 對照 (spiking control),同時進行PCR 反應。

4.將準備好的PCR 管放置在PCR 儀中,按照特定循環(huán)條件運行。

5.實驗數(shù)據(jù)分析

PCR 的產(chǎn)物需要通過瓊脂糖凝膠電泳檢測。

產(chǎn)物長度: 1000 b.p.

陰性的實驗結果有幾個可能性:

本中不存在目的片段;

樣本中目的片段的量低于檢測值;

樣本中存有 PCR 抑制物。

 

Spiking 對照

試劑盒中設計spiking 對照 (spiking control) 是為了確定沒有發(fā)生PCR 抑制。如果樣本中加了陽性對照以后得出陰性結果,說明樣本中存在PCR 抑制物,那幺此次陰性的實驗結果就不能作為正確的結果,需要重新開始樣本核酸的提取和PCR 擴增。

 


 
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