為進(jìn)一步探討香菇菌多糖的作用機(jī)理，我們進(jìn)行了香菇菌多糖對免疫功能的影響及抗腫瘤實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)總結(jié)如下：
一、材料與方法：
1、香菇菌多糖注射液：針劑，每支2ml/4mg,；
2、實(shí)驗(yàn)動物：昆明種小鼠，蘭州生物制品研究所動物室提供，C57/BL小鼠由甘肅省腫瘤研究所動物室提供。二組小鼠雌雄兼有，體重為17－22克；
3、瘤株:肝癌(Hep)，腦瘤(B22)，艾氏腹水癌(EC)，肉瘤180(S180)分別由上海藥物所和北京藥物所引來，在甘肅省腫瘤研究所動物室傳代半年以上。
4、試劑及其他材料：植物血凝素(PHA)，環(huán)磷酰胺，肝素鈉注射液，Hanks溶液，戊二醛混合液，活小牛血清，綿羊紅細(xì)胞懸液，雞紅細(xì)胞懸液，瑞姬染液，甲醇及生理鹽水等。
5、給藥劑量及途徑：小鼠隨機(jī)分組，試驗(yàn)組每日皮下注射香菇菌多糖注射0.2ml/0.4ml，連續(xù)5天停藥1天，于第7天作實(shí)驗(yàn)觀察各項(xiàng)免疫指標(biāo)。同時設(shè)空白對照組，鹽水對照組，PHA對照組?？鼓[瘤試驗(yàn)給藥劑量為6.6mg/kg，腹腔注射（ip），連續(xù)給藥10天，并設(shè)環(huán)磷酰胺為陽性對照。
6、實(shí)驗(yàn)方法：巨噬細(xì)胞吞噬功能的測定按參考文獻(xiàn)進(jìn)行;E玫瑰花結(jié)形成實(shí)驗(yàn)按參考文獻(xiàn)進(jìn)行；淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)按體內(nèi)法進(jìn)行。抗腫瘤實(shí)驗(yàn)，按1979年全國抗抗癌協(xié)會制定“抗腫瘤藥物體內(nèi)篩選規(guī)程”進(jìn)行。
二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1、香菇菌多糖對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響：見表1。從表1結(jié)果可見，香菇菌多糖組小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)與空白對照組及生理鹽水對照組有顯著差異。說明香菇菌多糖可以提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能。
表1 香菇菌多糖對巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響
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組別 |
X±SX(n) |
T |
P |
|
空白對照組 |
21.70±0.497(10) |
14.359 |
<0.001 |
|
生理鹽水對照組 |
24.20±0.917(10) |
15.614 |
<0.001 |
|
香菇菌多糖組 |
42.75±0.770(10) |
|
|
2、香菇菌多糖對小鼠E玫瑰花結(jié)形成的影響：見表2。從表2說明，香菇菌多糖能增強(qiáng)小鼠外周血E玫瑰花結(jié)的形成，與空白對照及生理鹽水對照組相比，有顯著差異。
表2 香菇菌多糖對小鼠E玫瑰花結(jié)形成的影響
組別 X±SX(n) T P 空白對照組 36.00±0.874(11) 15.623 <0.001 生理鹽水對照組 24.20±1.129(11) 22.850 <0.001 香菇菌多糖組 42.75±0.684(11)
3、香菇菌多糖對淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響,見表3。香菇菌多糖能促進(jìn)小鼠體內(nèi)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，與空白對照及生理鹽水對照組比較有顯著差異。與PHA組比較，無顯著性意義。說明小鼠體內(nèi)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的提高，是香菇菌多糖作用的結(jié)果，并非是PHA刺激作用的結(jié)果。
表3 香菇菌多糖對小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響
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組別 |
X±SX(n) |
T |
P |
|
空白對照組 |
19.50±3.36(10) |
7.228 |
<0.01 |
|
PHA對照組 |
38.90±2.97(10) |
1.607 |
<0.05 |
|
生理鹽水對照組 |
30.10±1.79(10) |
4.067 |
<0.01 |
|
香菇菌多糖組 |
46.18±3.38(10) |
|
|
4、香菇菌多糖對小鼠移植瘤Hep及B22等瘤株的作用，見表4。表4表明香菇菌多糖對瘤株B22抑制率為42%，對Hep的抑制率為11.57-43.16%之間，對EC的抑制率為14.80%，S180的抑制率為2%，陽性對照組環(huán)磷酰胺對Hep抑制率是65.07%。香菇菌多糖對Hep的抑制率與給藥劑量有關(guān)，當(dāng)5－6.6mg/kg時的抑制率在35.78－43.06%之間，劑量增大到10mg/kg對Hep的抑制率為11.57－11.96%。香菇菌多糖組與陽性對照組環(huán)磷酰胺（CY）組比較，CY的抑制率更顯著，但在實(shí)驗(yàn)終了時，香菇菌多糖組小組體重增加，CY組小鼠體重明顯減輕。說明香菇菌多糖除對腫瘤細(xì)胞的生長有抑制作用外，還有強(qiáng)壯身體的作用。
表4 香菇菌多糖對小鼠移植性腫瘤的作用
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樣品名稱 |
瘤株 |
劑量 |
給途徑及次數(shù) |
動物數(shù) |
動物體重/克 |
瘤重(克)/生存天數(shù)(天) |
抑瘤率 |
P |
備注 |
|||
|
開始 |
結(jié)束 |
開始 |
結(jié)束 |
|||||||||
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給藥/ |
給藥/ |
給藥/ |
給藥/ |
治療 |
對照 |
|||||||
|
香 菇 菌 多 糖 |
B22 |
6.6 |
ipX10 |
10/10 |
9/8 |
20.5/20.4 |
25.5/26.0 |
0.478±0.557 |
0.6275±0.638 |
42.24 |
<0.05 |
提前給藥5天 |
|
Hep |
6.6 |
ipX10 |
10/10 |
8/9 |
20.4/20.4 |
18.0/26.4 |
0.75±0.27 |
1.24±0.41 |
38.42 |
|
|
|
|
Hep |
6.6 |
ipX10 |
10/12 |
9/12 |
21.1/25.0 |
23.8/21.9 |
0.65±0.25 |
1.07±0.57 |
39.42 |
<0.05 |
|
|
|
Hep |
10 |
ipX10 |
10/15 |
10/13 |
21.4/32.4 |
21.4/23.4 |
0.97±0.21 |
1.10±0.32 |
11.96 |
|
|
|
|
Hep |
6.6 |
ipX10 |
10/12 |
10/11 |
22.2/26.3 |
20.8/26.8 |
1.03±0.57 |
2.03±1.11 |
35.78 |
|
停藥一周處理 |
|
|
Hep |
5.0 |
ipX10 |
10/13 |
9/12 |
23.6/36.6 |
25.6/23.5 |
0.79±0.28 |
1.39±0.59 |
43.06 |
<0.02 |
提前5天給藥 |
|
|
Hep |
10 |
ipX10 |
10/10 |
8/9 |
23.1/22.7 |
33.5/28.5 |
0.70±0.26 |
0.79±0.25 |
11.57 |
|
|
|
|
Hep |
6.6 |
ipX10 |
10/10 |
8/9 |
23.1/22.7 |
33.5/28.5 |
0.85±0.27 |
1.40±0.58 |
39.42 |
|
停藥5天處理 |
|
|
EC |
5.0 |
ipX10 |
10/13 |
8/10 |
21.6/27.4 |
25.0/26.8 |
0.98±0.53 |
1.16±0.52 |
14.87 |
|
|
|
|
S180 |
10 |
ipX10 |
10/12 |
9/11 |
21.8/26.2 |
27.0/26.1 |
2.3±1.003 |
2.35±0.95 |
2.0 |
|
|
|
|
CY |
Hep |
30 |
ipX10 |
9/10 |
8/8 |
19.0/19.2 |
17.2/21.0 |
0.388 |
1.112 |
65.07 |
<0.001 |
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三、討論
經(jīng)小鼠免疫功能實(shí)驗(yàn)，香菇菌多糖有顯著提高巨噬細(xì)胞吞噬作用，有顯著提高小鼠外周血E玫瑰花形成和體內(nèi)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，表明香菇菌多糖有提高機(jī)體免疫力的作用。
